Molecular characterization of Toxoplasma gondii isolates from free-range chickens reveals new genotypes in Goiânia, Goiás, Brazil / Caracterização molecular de Toxoplasma gondii isolados de galinhas caipiras revela novos genótipos em Goiânia, Goiás, Brasil

Abstract The aim of this study was to evaluate the genotypic characteristics of Toxoplasma gondii isolated from free-range chickens in the metropolitan area of Goiânia, Goiás, in Brazil's central-west region. The seroprevalence rate was found to be 96%, according to an indirect hemagglutination assay. Brain and heart samples were processed by peptic digestion for a mice bioassay. The tissues were homogenized and the resulting samples were subjected to polymerase chain reaction (PCR), which revealed that 64% of them contained the parasite's DNA. The mice bioassay revealed 15 isolates, 8 of them tachyzoites isolates from the peritoneal lavage and 7 from brain cysts. T. gondii genotypes were determined through PCR-RFLP, using the following markers: SAG1, SAG2, SAG3, BTUB, GRA6, c22-8, c29-2, L358, PK1, alt. SAG2, Apico and CS3. Three genotypes were identified, inclued ToxoDB #65, and the other two are not yet described in the literature. Hence, we conclude that the isolates obtained from the metropolitan area of Goiânia showed relatively low genetic diversity.

Resumo O objetivo deste estudo foi avaliar as características genotípicas de Toxoplasma gondii isolados de galinhas caipiras da Região Metropolitana de Goiânia, Goiás, Região Centro Oeste do Brasil. A soroprevalência foi de 96% dos animais, determinada por hemaglutinação indireta. As amostras de cérebro e coração foram processadas através da digestão péptica para o bioensaio em camundongos. Os tecidos foram homogeneizados, e as amostras resultantes foram analisadas por reação em cadeia da polimerase (PCR), que possibilitou a detecção do DNA do parasito em 64% deles. Por meio do bioensaio em camundongos, foi possível detectar 15 isolados, 8 deles apresentando taquizoítos na lavagem peritoneal e 7 apresentando cistos cerebrais. A determinação dos genótipos de T. gondii foi realizada por PCR-RFLP com os seguintes marcadores: SAG1, SAG2, SAG3, BTUB, GRA6, c22-8, c29-2, L358, PK1, alt. SAG2, Apico e CS3. Foi possível definir 3 genótipos, incluindo o ToxoDB # 65 e dois deles ainda não foram descritos na literatura. Portanto, conclui-se que os isolados obtidos na região metropolitana de Goiânia apresentaram diversidade genética relativamente baixa.

Cross-sectional survey for toxoplasmosis in free-range chickens (Gallus gallus domesticus) from the Atlantic Forest area in Alagoas state, Northeastern Brazil / Estudo transversal para toxoplasmose em galinhas caipiras (Gallus gallus domesticus) de área de Mata Atlântica do estado de Alagoas, Nordeste do Brasil

Abstract Toxoplasmosis is a parasitic disease, which is prevalent across the world and has a strong environmental component in its transmission chain. The present study determined the seroprevalence and factors related to Toxoplasma gondii infection among free-range chickens from an Atlantic Forest area in Northeastern Brazil. A total of 550 free-range chickens were tested for T. gondii antibodies usingthe indirect fluorescent antibody test (IFAT, cut-off point 1:16), and 269 (48.9%; 95% CI = 44.7-53.1%) were positive. Among the 61 properties 57 (93.4%) had at least one seropositive animal. The robust Poisson regression model showed that the variables/categories associated with the seroprevalence of T. gondii were: region of origin of the animals/urban area (prevalence ratio [PR] = 2.346; P<0.001), management system/use of cages (PR = 1.591; P = 0.019), presence of rodents/yes (PR = 1.295; P = 0.035), and the type of food/use of food scraps (PR = 1.603; P = 0.009). The high prevalence found suggest that this scenario demands careful management, mainly regarding the use of scraps of undercooked or raw food, adequate environmental hygiene and frequent rodentcontrol.

Resumo A toxoplasmose é uma doença parasitária mundial com um forte componente ambiental em sua cadeia de transmissão. Nesta pesquisa, foram determinados a soroprevalência e os fatores associados em galinhas caipiras de uma área de Mata Atlântica no Nordeste do Brasil. Um total de 550 galinhas caipiras foi testado para anticorpos anti-Toxoplasma gondii pela reação de imunfluorescência indireta (RIFI) com ponto de corte de 1:16, e 269 (48,9%; IC95% = 44,7- 53,1%) foram positivas. Das 61 propriedades visitadas, 57 (93,4%) apresentaram pelo menos um animal positivo. O modelo de regressão de Poisson robusta mostrou que as variáveis/categorias associadas à soroprevalência de T. gondii foram: origem dos animais/área urbana (razão de prevalência - RP = 2,346; P<0,001), sistema de manejo/uso de gaiolas (RP = 1,591; P = 0,019), presença de roedores/sim (RP = 1,295; P = 0,035), e tipo de alimento/uso de sobras de alimentos (RP = 1,603; P = 0,009). A alta prevalência sugereque este cenário demanda cuidados de manejo, principalmente no que se refere ao fornecimento de sobras de alimentos mal cozidos ou crus, higiene adequada do meio ambiente e controle frequente de roedores.

Parasitism of gallus gallus (linnaeus, 1758) by species of phthiraptera on free-range chickens in the southern region of Rio Grande do Sul, Brazil / Parasitismo de Gallus Gallus (Linnaeus, 1758) por espécies de Phthiraptera em criações coloniais na região sul do Rio Grande Do Sul, Brasil

This study was conducted in order to identify the species of biting lice (order Phthiraptera: Amblycera suborders and Ischnocera) that infest free-range chickens in southern Rio Grande do Sul, Brazil. Fifty adult females from 10 farms located in 5 different municipalities were examined for ectoparasites. The chickens were euthanized and then washed with water and detergent for the collection of ectoparasites by filtration using a 150-µm mesh sieve, then separated into pellet and supernatant, which were preserved in ethanol 70% for the screening procedures and identification. A total of 19,437 lice were examined, presenting the following breakdown by species: Menopon gallinae (85.9%), Goniodes dissimilis (6.1%), Lipeurus caponis (3.0%), Goniocotes gallinae (2.5%), Menacanthus pallidus (2.1%) and Menacanthhus stramineus (0.1%). It was found that all the chickens examined were parasitized by one or more species of Phthiraptera, the multiple and moderate level of infestation (101 to 1,000 lice/chicken) being the most frequent. M. gallinae was the most frequent and abundant species (100% of the chickens parasitized and an average of 334.1 lice/chicken). The degree of infestation of chickens varied among the farms, averaging 41.2 to 680 lice/chicken.

Este estudo foi realizado com o objetivo de conhecer os piolhos (ordem Phthiraptera: Subordens Amblycera e Ischnocera) infestantes de galinhas de criações coloniais no Sul do Rio Grande do Sul. Cinquenta fêmeas adultas foram examinadas, de 10 propriedades rurais localizadas em 5 diferentes municípios. As aves foram eutanasiadas e posteriormente lavadas com água e detergente para coleta dos ectoparasitos através de filtragem por passagem em tamis com malha de 150 µm, separando-se em sedimento e sobrenadante, os quais foram preservados em etanol 70% até os processos de triagem e identificação. Cerca de 19.437 piolhos foram examinados e apresentaram a seguinte composição específica: os resultados indicam que a fauna de Phthiraptera em galinhas caipiras na região é composta por: Menopon gallinae (85,9%), Goniodes dissimilis (6,1%), Lipeurus caponis (3,0%), Goniocotes gallinae (2,5%), Menacanthus pallidus (2,1%) e Menacanthus stramineus (0,1%). Constatou-se que todas as aves examinadas estavam parasitadas por uma ou mais espécies de Phthiraptera, com predomínio de infestações múltiplas e moderadas (101 a 1.000 piolhos/ave). M. gallinae é a espécie mais prevalente e abundante (100% das aves parasitadas e média de 334,1 espécimes/ave). O grau de infestação das aves variou entre as propriedades, com médias de 41,2 a 680 piolhos/ave.

Identificação de espécies de Emeria sp e avaliação do escore de lesões intestinais entre frangos vacinados e tratados com anticoccidiano, produzidos no sistema colonial/caipira / Identification of Eimeria species and evaluation of intestinal lesion scores in vaccinated chickens and chickens treated with anticoccidial drugs in the free-range chicken systems

Este trabalho tem por objetivo identificar as espécies de Eimeria que acometem os frangos criados no Sistema Colonial/Caipira que utilizam como medidas profiláticas a vacinação e medicação anticoccidiana. E avaliar as lesões intestinais causadas pelas cepas vacinais e de campo. A ocorrência das espécies de Eimeria em frangos tratados e vacinados foram respectivamente de 46 e 49 para a Eimeria maxima, 35 e 28 para a Eimeria tenella, 26 de Eimeria acervulina para frangos vacinados e para os tratados 8 de Eimeria necatrix r 8 de Eimeria praecox. As médias do escore de lesões instestinais foram de 0,28 e 0,80 na porção superior do instestino; 0,07 e 0,03 na porção média; e 0,05 e 0,10 para o ceco, em frangos vacinados e tratados, respectivamente. As aves vacinadas apresentaram pico de eliminação de oocistos na idade de 21 dias de produção sendo a média da contagem de 70.828 oocistos na idade de 37 dias de produção. Embora as aves vacinadas tenham apresentado uma média de eliminação de oocistos superior à das aves tratadas o escore de lesão destas foi inferior conferindo melhor proteção às aves

The purpose of this research was to identify the Eimeria species, in free-range chickens as well as topropose a prophylactic treatment through vaccination and the use of anticoccidial drugs, and to evaluatethe intestinal damages caused by strains of vaccinal and field oocysts. In this system the occurrence ofEimeria species in chickens which were treated and vaccinated were respectively of 46% and 49% forEimeria maxima, 35% and 28% for Eimeria tenella, 26% for Eimeria acervulina for vaccinated chickensand for those which were treated 8% for Eimeria necatrix and E. praecox. The averages of intestinaldamages measured by lesion score were 0.28 and 0.80 respectively in the upper intestine for vaccinatedand treated chickens, 0.07 and 0.03 for the middle intestine, and 0.05 and 0.10 for the ceca. The vaccinatedchickens showed peaks of oocyst elimination in the 21th day with an average of 70,828 oocysts per gramof excretes and the chickens treated with anticoccidial drugs had an average of 7,020 in the 37th day.Although the vaccinated chickens presented an average of oocysts elimination higher than the treatedchickens, the lesion score of these chickens was lower